2026-11-11｜重建人類表皮・改良 IVPT・AF200／TEER
對穿透量低、難以定量的外用藥，研究者能否用重建人類表皮比較配方？Agonia 等人的研究以 clotrimazole 乳膏為例，測試方法能否辨識藥物濃度差異，同時用水分散失與電阻量測追蹤組織屏障。這是一項特定體外方法的可行性研究，結果應連同模型與品質限制一起閱讀。
研究問題：方法能否分辨配方差異？
研究比較兩種 1% clotrimazole 乳膏：試驗產品與 Canesten 參考產品。另以相同試驗配方基底製備 0.5% 與 2% 乳膏，檢驗方法能否分辨濃度差異，並使用不含活性成分的安慰劑確認分析干擾。這裡的 0.5% 與 2% 是用來檢驗鑑別力的非等效對照，不是未處理空白。
簡要方法
- 模型為 EPISKIN® 重建人類表皮（RhE），不是離體全層人皮或豬皮。研究使用五個組織批次，每種配方最終分析 12 個組織插入物；這不等於 12 位獨立捐贈者或 12 位受試者。
- 乳膏施於組織插入物上方，接收液位於下方。依正文使用有限劑量 15 mg/cm²，於 37 ± 1°C 培養環境中測試 48 小時，以 HPLC-DAD 定量接收液中的 clotrimazole。
- 接收液為 PBS pH 7.4／丙二醇 60:40（v/v），另含 0.02% 疊氮化鈉。這是該研究的特定條件，不宜直接套用到其他藥物或皮膚模型。
- 完整性評估包括目視檢查，並對選定組織作 TEWL 與／或 TEER 量測。儀器檢查每批僅一至兩個代表性組織，並非所有插入物都有完整前後測。
方法來源：原文 §2.2–2.5，閱讀方法全文。
主要結果：在這個模型中看見濃度差異
下列為正式試驗表 2 的平均值，每配方 n = 12 個組織插入物。累積滲透量是穿過模型進入接收液的量，不是人體實際吸收量。
| 乳膏配方 | 24 h 累積滲透量 µg/cm² | 論文報告的最大通量 µg/cm²/h |
|---|---|---|
| 0.5% 試驗基底（D） | 10.68 | 0.51 |
| 1% 試驗產品（A） | 20.23 | 0.94 |
| 1% Canesten 參考產品（B） | 18.50 | 0.88 |
| 2% 試驗基底（C） | 37.27 | 1.63 |
兩個 1% 產品比較時，24 h 累積量、48 h 累積量及最大通量的 90% 信賴區間，分別為 97.46–119.73%、94.80–116.95% 與 93.57–119.19%，均落在研究採用的 80.00–125.00% 等效區間。0.5% 與 2% 對照則未落在相同區間，支持方法對這三種藥物濃度的鑑別能力。
這些是研究設定下的體外比較結果，不等於臨床療效已證實相同，也未證明此方法能辨識所有賦形劑、製程或微結構差異。
AF200 在研究中負責什麼？
研究使用 Biox Systems AquaFlux AF200 冷凝腔式儀器測量 TEWL（經皮水分散失），並搭配 TEER（跨上皮電阻）及目視檢查評估屏障狀態。AF200 提供的是水分散失讀值，藥物滲透量則由接收液的 HPLC-DAD 分析取得。
部分組織在終點的 TEWL 升高，TEER 也有下降，因此不能寫成「AF200 證實屏障全程未受損」。作者推測終點移除配方可能影響組織，並指出後段沒有明顯異常的藥物滲透增加；這是作者對資料的解讀，不能取代更完整的屏障驗證。
量測與解讀來源：原文 §2.5.5、§3.4 及表 4。
閱讀結果時，必須保留的限制
- 質量平衡偏低：各產品平均總回收約 80–82%，低於研究引用草案的 90–110%。不能因作者認為仍可比較配方，就說所有驗證條件完全達標。
- 模型與溫度：僅測試一種活性成分及一種 RhE 模型，沒有同步離體人體皮膚比較組。試驗用 37°C，尚未完成與約 32°C 條件的比較，不能直接推估人體吸收。
- 組織與接收液：組織在非維持培養液環境可能隨時間改變活性與屏障。接收液含 40% 丙二醇，雖從組織底部接觸，仍不宜完全排除其影響。
- 設計與資料：兩個組織因萃取液灑出而排除，末批配置有所調整，最終仍報每配方 n = 12。代表性完整性量測不足以證明每個組織狀態都一致。
- 研究背景：研究獲 Labfit-HPRD、Laboratórios Basi、EPISKIN 與葡萄牙公共研究資金支持，部分作者與組織模型供應商、產品供應商及體外測試服務商有關聯。
對方法規劃的啟示
先確認研究要回答的是「相同條件下的配方比較」，還是「實際皮膚吸收量」。模型通透性較高可能有助於低滲透藥物的定量，但選材、接收液、溫度、質量平衡與完整性檢查，都需要一起驗證。TEWL 是其中一項資訊，應與藥物分析結果分開報告、合併解讀。
原始文獻
Agonia AS, Palmeira-de-Oliveira A, Cardoso C, Augusto C, Pellevoisin C, Videau C, Dinis-Oliveira RJ, Palmeira-de-Oliveira R. Reconstructed Human Epidermis: An Alternative Approach for In Vitro Bioequivalence Testing of Topical Products. Pharmaceutics. 2022;14(8):1554. 2022-07-26 發表。DOI：10.3390/pharmaceutics14081554｜出版商全文。
本文為沃生農科自撰繁體中文研究摘要，數據依原文重新整理，概念圖為原創，未轉載論文圖片。原文以 CC BY 4.0 授權公開，原作者與出處如上。
本篇解說 2022 年研究及其使用的歷史草案，不宣稱現行主管機關已採認此模型，不取代完整試驗方法、現行法規要求或醫療建議。